TTF-1、P63、Ki-67……这些肺癌常用免疫组化指标都有什么意义？

​一、肺腺癌

1、TTF-1

TTF-1 （甲状腺转录因子-1）表达于甲状腺滤泡上皮和肺泡上皮细胞的细胞核中。与肿瘤分化程度正相关，分化越差则越可能表达缺失。

肺腺癌中约75%-85%表达阳性。鳞癌通常不表达TTF-1（故TTF-1主要用于腺癌、鳞癌鉴别，不能鉴别肺腺癌和NETs）。

TTF-1表达于肺神经内分泌肿瘤（NETs），包括类癌（典型类癌TC、非典型类癌AC）、50%的大细胞神经内分泌癌（LCNEC）及90%的小细胞肺癌（SCLC）

在肺的转移性腺癌中，TTF-1 几乎均阴性，与甲状腺肿瘤的鉴别：TG 阴性；

此外，TTF-1 被发现在少数卵巢（3%-39%）、子宫内膜（2%-23%）和宫颈腺癌（4%）中表达。

2、CK7（cytokeratin-7）

几乎 100% 的肺腺癌均表达 CK7，但 CK7 的特异性较低，30%-60% 的肺鳞癌阳性。还可在乳腺、胃、卵巢、胰腺、子宫、尿路上皮等多种器官和部位发生的腺癌中表达。

肺腺癌鉴别诊断时，需与TTF-1、Napsin A联合应用。

3、Napsin A

NapsinA （新天冬氨酸蛋白酶 A）在正常肺泡 II 型上皮细胞和近端与远端肾小管中表达，80% 以上在肺腺癌中表达，其敏感度和特异度均优于TTF-1。

与TTF-1相似，Napsin A在肺腺癌中表达也与组织学类型、分化程度具有相关性。

3%肺鳞癌表达Napsin A，肺神经内分泌肿瘤不表达Napsin A（可用于肺腺癌和NETs鉴别）。还可表达于部分转移性肺癌，如肾细胞癌、少部分甲状腺乳头状癌、子宫内膜腺癌、卵巢腺癌、胆管细胞癌等。

TTF-1和Napsin A是目前诊断肺腺癌最优秀的抗体组合之一。

二、肺鳞癌

1、p63

超过 90% 的肺鳞癌细胞核强阳性，但有 10%-33%的肺腺癌呈局灶性低水平表达P63。

另在 15% 的神经内分泌癌、22% 的小细胞肺癌中表达 P63。

2、p40

P40 是 P63 蛋白的亚型之一，阳性定位在细胞核。其被认为是特异性和敏感性最高的鳞癌标志物。

其敏感性类似p63，但特异性优于p63，超过96.8%的鳞癌表达阳性，腺癌基本不表达（3-5%），且常局灶表达。内分泌肿瘤中，类癌不表达，大细胞肺癌3.6%，2.4%间皮瘤表达。

3、CK5/6

CK5/6 正常时主要表达于鳞状上皮细胞、导管上皮基底细胞、肌上皮细胞和间皮细胞中。

75%~100%的肺鳞癌有表达，且与分化、分级无关。2%~33%的肺腺癌可表达CK5/6，但常呈局灶性低水平表达。75%~100%的胸膜上皮样恶性间皮瘤也表达。

4、DSG3

DSG3（桥粒芯糖蛋白）在 85%-90% 肺鳞癌中表达，肺腺癌几乎不表达（<2%）。

92.6%鳞癌可通过CK5/6、DSG3组合诊断。＞85%肺腺癌、鳞癌可通过DSG3和Napsin A区别。

三、神经内分泌肿瘤

1、Syn

Syn（突触素）主要存在于神经元突触前囊泡膜、肾上腺髓质、颈动脉体及皮肤和内脏的神经性和上皮性神经内分泌细胞。

此抗体主要用于标记神经内分泌细胞及其肿瘤。

2、CgA

CgA（嗜铬素 A）是人类肾上腺髓质中含量最高的一种可溶性酸性蛋白，其广泛存在于神经元、神经内分泌细胞及其肿瘤细胞中。

其主要用于标记神经内分泌肿瘤，如垂体肿瘤、胰岛细胞瘤、嗜铬细胞瘤、甲状腺髓样癌、类癌等。

3、CD56

神经细胞黏附分子（NCAM，CD56）表达于 NK 细胞和小部分活化的 T 淋巴细胞及神经外胚层起源的细胞。

此抗体是 NK 细胞淋巴瘤的标志物，也是肺神经内分泌肿瘤首选的特异性标志物。

4、Ki-67

Ki-67是一种细胞增殖相关的核抗原，其功能与有丝分裂密切相关。Ki-67标记的是处于增殖周期中的细胞，其阳性率越高，肿瘤生长越快，组织分化越差，对化疗也越敏感。

Ki-67对肺神经内分泌癌具有诊断和分级双重作用。如典型类癌的Ki-67增殖指数≤5%，属于低级别，非典型类癌为5%~20%，属于中级别，大细胞肺癌通常≥60%，属于高级别。

TTF-1、Napsin A、CK5/6和p63（p40）是目前鉴别肺腺癌和鳞癌最常用的抗体组合。

通常TTF-1/p63组合在腺癌和鳞癌均是一个阳性一个阴性。

• 如果TTF-1/p63均阳性，倾向于诊断腺癌，因为p63可以在腺癌中表达而TTF-1几乎不在鳞癌中弥漫性表达（＞50%的肿瘤细胞表达）。

• 如果TTF-1/p63均阴性，则仍然怀疑腺癌，因为TTF-1在差分化腺癌中缺失表达的现象较常见，而p63在鳞癌中的表达非常稳定。

所有鳞癌标志物均不能鉴别转移性鳞癌、上皮癌甚至包括肉瘤和大细胞淋巴痛（P63可阳性）。而p40在上述大细胞淋巴瘤中不表达，因此选择p40代替p63能有效避免将肺或纵隔的大细胞淋巴瘤误诊为鳞癌。

五、肺原发性肿瘤与继发性肿瘤的鉴别

一般而言，转移到肺的腺癌以乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、子宫颈腺癌、子宫内膜癌、结肠腺癌及间皮瘤多见，通常转移瘤与原发瘤具有共同的抗原表达。

六、肺癌与胸膜间皮瘤的鉴别

尚无100%的特异性标志物，因此应至少选择2个间皮和2个上皮标志物。

根据抗体的敏感度和特异度，间皮瘤最好的标记为钙视网膜蛋白（Calretinin）、CK5或CK5/6、Wilms肿瘤基因1（Wilmstumourgene-1，WT-1）和D2-40。

七、大细胞肺癌的鉴别

根据定义（WHO2015），大细胞肺癌一种未分化的非小细胞肺癌，其在细胞学和组织结构及免疫表型等方面缺少小细胞癌、腺癌及鳞癌的特征，且必须是手术切除标本才能做出大细胞癌的诊断。免疫组化和粘液染色对诊断大细胞癌是必要的。