AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY：新冠肺炎尸检眼部组织中的组织病理学和SARS-CoV-2细胞定位

严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）感染整个人体组织，包括眼组织和液体。在结膜拭子、角膜、脉络膜/巩膜、晶状体、视网膜、视神经以及水性和玻璃体液和玻璃体中检测到SARS-CoV-2 RNA和液体。在之前的一项研究中，系统地调查了SARS-CoV-2感染、持久性和复制，包括38例冠状病毒疾病2019（COVID-19）尸检病例的眼组织。1在38例（61%）的病例中，通过液滴数字PCR（ddPCR）在眼液和/或组织中检测到SARS-CoV-2核衣壳（N）RNA。

具体来说，在角膜[19个中的8个（42%）]、脉络膜/巩膜[32个中的16个（50%）个（50%）个、晶状体[19个中的10个（53%）]、视网膜[17个中的6个（35%）][视神经[29个中的17个中的5个（59%）个（59%）]、玻璃体液[35个中的5个（14%）]和水液[32个中的8个（25%）]中检测到N RNA。在疾病持续时间较长的个体中，N RNA的总体上较低，在几种组织类型中持续数月。ddPCR阳性组织和眼液也检测了亚基因组RNA，这是最近病毒复制的标志。在22例测试病例中的7例（32%）的眼组织中检测到亚基因组RNA，包括在患病99天后死亡的患者的脉络膜/巩膜中。

尽管报告了这些发现，但关于SARS-CoV-2在眼组织内的细胞定位及其相关病理发现的信息有限。特定眼细胞中的病毒颗粒定位可以提供有关SARS-CoV-2感染可能对眼部影响的相关信息。2023年2月16日被AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY接受的文章，进一步检查上述COVID-19尸检队列的眼组织，以评估宏观和微观组织病理学，并通过SARS-CoV-2尖峰基因RNA的原位杂交（ISH）来研究SARS-CoV-2的细胞定位。

在之前的一项研究中，系统地调查了SARS-CoV-2感染、持久性和复制，包括38例冠状病毒疾病2019（COVID-19）尸检病例的眼组织。1在38例（61%）的病例中，通过液滴数字PCR（ddPCR）在眼液和/或组织中检测到SARS-CoV-2核衣壳（N）RNA。具体来说，在角膜[19个中的8个（42%）]、脉络膜/巩膜[32个中的16个（50%）个（50%）个、晶状体[19个中的10个（53%）]、视网膜[17个中的6个（35%）][视神经[29个中的17个中的5个（59%）个（59%）]、玻璃体液[35个中的5个（14%）]和水液[32个中的8个（25%）]中检测到N RNA。

2019年冠状病毒疾病患者死后眼的组织病理学发现

在疾病持续时间较长的个体中，N RNA的总体上较低，在几种组织类型中持续数月。ddPCR阳性组织和眼液也检测了亚基因组RNA，这是最近病毒复制的标志。在22例测试病例中的7例（32%）的眼组织中检测到亚基因组RNA，包括在患病99天后死亡的患者的脉络膜/巩膜中。尽管报告了这些发现，但关于SARS-CoV-2在眼组织内的细胞定位及其相关病理发现的信息有限。

特定眼细胞中的病毒颗粒定位可以提供有关SARS-CoV-2感染可能对眼部影响的相关信息。2023年2月16日被AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY接受的文章，进一步检查上述COVID-19尸检队列的眼组织，以评估宏观和微观组织病理学，并通过SARS-CoV-2尖峰基因RNA的原位杂交（ISH）来研究SARS-CoV-2的细胞定位。

研究人员在NIH临床中心进行尸检时，获得了25名确诊SARS-CoV-2感染患者的尸检人眼（E1至E25）。1该研究坚持《赫尔辛基宣言》的原则。这些病例在死亡前有一系列疾病持续时间，并按死亡时的疾病日（D）分别分为早期（n = 11）、中期（n = 7）或晚期（n = 7），分别为D14或更早，D15至D30或D31或更晚。此前，从E1到E25的一只眼睛是新解剖的，后来将组织保存在RNA中，以便随后通过ddPCR量化SARS-CoV-2 RNA。

这项研究说明了在25例致命的COVID-19病例队列中，SARS-CoV-2在特定眼组织和细胞中的组织病理学特征和分子定位。无论死前疾病持续时间如何，在所有21只接受恶心和组织病理学评估的眼睛中，都观察到暗示间接病毒效应的异常，包括细胞质体、血管变化、视网膜水肿和轻微炎症。21只眼睛中有14只（67%）来自ddPCR对侧眼睛对SARS-CoV-2阳性的病例。

据研究人员所知，这是ISH证明的首次报告SARS-CoV-2 RNA在视网膜中定位，包括内核和外核层和神经节细胞。这些发现与Casagrande等人的发现一致，他们之前报告称，RT-PCR3在14只眼睛中的3只眼睛的视网膜活检中检测到SARS-CoV-2 RNA，但与Bayyoud等人不同，后者没有在5名已故COVID-19捐赠者的10只尸体眼中检测到SARS-CoV-2 RNA。

综上所述，本研究显示了对SARS-CoV-2眼部发病机制的重要新见解。具体来说，这是ISH将SARS-CoV-2明确定位到视网膜内外核细胞、视网膜神经节细胞和眼表面的第一份报告，验证了之前专门使用基于PCR的方法的研究。这些观察突出表明，需要更好地阐明SARS-CoV-2感染机制和眼睛的持久性，相关的直接和间接发病机制，以及新冠肺炎幸存者的长期眼后遗症。

原文出处

Sen HN, Vannella KM, Wang Y, Chung JY, Kodati S, Ramelli SC, Lee JW, Perez P, Stein SR, Grazioli A, Dickey JM, Ylaya K, Singh M, Yinda KC, Platt A, Ramos-Benitez MJ, Zerbe C, Munster VJ, de Wit E, Warner BM, Herr DL, Rabin J, Saharia KK; NIH COVID-19 Autopsy Consortium; Kleiner DE, Hewitt SM, Chan CC, Chertow DS. Histopathology and SARS-CoV-2 Cellular Localization in Eye Tissues of COVID-19 Autopsies. Am J Pathol. 2023 Nov;193(11):1809-1816. doi: 10.1016/j.ajpath.2023.02.016. Epub 2023 Mar 22.