Arthritis Rheumatol：EphB2受体促进系统性硬化症皮肤纤维化

系统性硬化症（SSc）是一种多系统性自身免疫疾病，其特点是皮肤和内脏器官的纤维化。皮肤纤维化是该疾病的主要表现形式之一，然而，目前对其治疗方法有限。越来越多的研究表明，EphB2受体酪氨酸激酶可能在组织纤维化中发挥重要作用。本研究的目的是验证EphB2在SSc相关的皮肤纤维化中的作用，探讨其作为治疗靶点的潜力。

研究首先通过对正常人和SSc患者的皮肤活检样本进行EphB2表达水平的分析，以确定其在SSc皮肤中的表达是否上调。随后，通过使用EphB2基因敲除小鼠，研究其在两种皮肤纤维化模型中的作用：一是博来霉素诱导的皮肤纤维化模型，二是紧皮小鼠（Tsk1/+）遗传模型。此外，采用EphB2激酶失活和过度活跃点突变小鼠，评估EphB2前向信号在博来霉素诱导的皮肤纤维化中的作用。最后，在体外实验中，分析了来自SSc患者和健康对照者的皮肤成纤维细胞，以研究EphB2在成纤维细胞转化为肌成纤维细胞过程中的功能。

研究结果

在本研究中，我们对EphB2在系统性硬化症（SSc）相关皮肤纤维化中的作用进行了深入探讨。首先，通过对来自SSc患者和健康对照的皮肤活检样本的分析，发现EphB2在SSc患者皮肤中的表达显著上调。免疫荧光染色结果显示，在SSc患者的皮肤中，EphB2主要表达于肌成纤维细胞，这些细胞是纤维化过程中胶原蛋白合成的主要细胞类型。此外，我们在体外培养的SSc皮肤成纤维细胞中同样观察到了EphB2表达的显著升高，与健康对照者相比，SSc患者的皮肤成纤维细胞中EphB2 mRNA和蛋白水平显著增加。

为了进一步验证EphB2在皮肤纤维化中的功能，我们使用了EphB2基因敲除小鼠模型。在博来霉素诱导的皮肤纤维化模型中，我们观察到EphB2敲除小鼠的皮肤厚度显著减少，胶原蛋白沉积降低，表明EphB2在纤维化过程中起到了重要的促进作用。同样，在紧皮小鼠（Tsk1/+）模型中，EphB2敲除小鼠的皮肤纤维化程度也明显减轻，这进一步支持了EphB2在SSc皮肤纤维化中作为一个关键调控因子的观点。

此外，通过在EphB2激酶失活和激酶过度活跃小鼠模型中的研究，我们发现EphB2前向信号传导在皮肤纤维化中起到了至关重要的作用。在博来霉素处理的小鼠中，激酶过度活跃的EphB2突变体小鼠表现出显著增加的皮肤厚度和胶原沉积，而激酶失活的小鼠则表现出纤维化程度的显著降低。进一步的分子分析显示，EphB2的前向信号可能通过调控TGF-β信号通路，影响成纤维细胞的活化和向肌成纤维细胞的转化。

在体外实验中，我们通过小干扰RNA（siRNA）敲低了人类皮肤成纤维细胞中的EPHB2基因，结果显示，EPHB2缺失显著抑制了TGF-β诱导的成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程，并减少了胶原蛋白的合成。此外，RNA测序分析揭示了EPHB2缺失后，TGF-β信号通路的负调控因子，如SMAD7和SMURF1/2，显著上调，这表明EphB2可能通过与TGF-β通路的交叉调控来促进皮肤纤维化的发展。

EphB2表达在SSc患者中上调

本研究揭示了EphB2在SSc皮肤纤维化中的关键作用，表明EphB2的过表达和活性增强可能在SSc皮肤纤维化的发生中起到重要作用。通过抑制EphB2或其信号通路，可能为SSc患者提供新的治疗策略，特别是在抑制异常的纤维化进程方面。

原始出处：

EphB2 Receptor Promotes Dermal Fibrosis in Systemic Sclerosis. Arthritis Rheumatol. 2024 Aug;76(8):1303-1316. doi: 10.1002/art.42858. Epub 2024 May 15. PMID: 38589317; PMCID: PMC11288787.