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免疫测定结果总是被干扰，原来是它惹的祸

2021-12-21 检验之声 网络

异嗜性抗体
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异嗜性抗体（HA）属人体内源性抗体，具有相对稳定的化学结构，一般无明确的免疫原，目前已知存在IgG型和IgM型。

 

作者：刘子豪
指导：陈瑛
单位：天津市肿瘤医院预防体检中心

 

异嗜性抗体（HA）属人体内源性抗体，具有相对稳定的化学结构，一般无明确的免疫原，目前已知存在IgG型和IgM型。
异嗜性抗体可与多种动物免疫球蛋白的Fc段和F（ab'）2区域的决定簇结合，在无抗原的情况下，桥连或封闭捕获抗体和检测抗体，使结合到固相的标记抗体升高或降低，引起检测结果假性升高或降低。
案例经过
  • 基本信息
查体人：男，63岁，来我科室查体，按正常流程进行空腹抽血、上下腹超声、胸片、心电图检查等。笔者在审核报告时发现该查体人员2017年、2020年肿瘤标志物CEA、F-PSA结果均未增高，但今年CEA结果突然成倍增高，F-PSA轻度增高。见于谨慎，笔者又调取了该查体人的生化、血常规、尿常规等结果，均未发现异常。
  • 免疫实验仪器及方法学
国产全自动免疫分析仪 ，吖啶酯化学发光法；进口全自动免疫分析仪 ，电化学发光法。
  • 检测、检查结果
国产仪器上肿瘤标志物检测结果如下（2017年正常、2020年正常、2021年异常）：

图1
进口仪器上肿瘤标志物检测，结果正常，如下：

图2
国产仪器上进行了二次复测，结果异常，如下：

图3
由于几次检测结果差异较大，笔者又调阅了该查体人员的其它查体结果，包括上下腹超声、心电图、胸片等结果，如下：

图4

图5

图6
发现该查体人超声结果：肝囊肿3.2*2.7cm，前列腺轻度增生。笔者立即与临床超声大夫进行沟通，得知肝囊肿可能会导致CEA轻度增高，但不会使其突然呈数倍甚至10倍以上增高[1]；前列腺轻度增生可以导致F-PSA结果异常。
笔者随即查阅了干扰免疫测定的影响因素的相关文献，发现：
在免疫测定中，影响检测结果的干扰因素有很多，这些干扰因素是一些与被检物质化学结构不同但活性相似的物质，如异嗜性抗体、人抗动物抗体、自身抗体、类风湿因子和其他蛋白等。当检验者怀疑存在内源性抗体干扰时，可通过稀释法、更换检测系统或使用阻断试剂进行多次确认及验证[2]。

 

  • 验证一
笔者更换进口仪器及试剂进行检测后结果正常，如图2。
原因分析：可能是由于各厂家采用试剂不同，试剂所包被抗体类型不同，亲和力不同，使用物理阻滞剂不同，导致异嗜性抗体对不同试剂产生的干扰程度不同，导致结果与之前出现较大差异。
  • 验证二
笔者将标本进行梯度稀释后，在国产仪器上进行检测，结果随之正常，如下：

图7
原因分析：当被测抗原浓度足够高，在稀释后仍然可在检测最低限度内，而异嗜性抗体浓度较低时，使用稀释法可以削弱其干扰能力。干扰物的浓度、异质性和位阻效应是样本稀释非线性的主要原因。稀释后如果检测结果在线性范围内，说明标本未受到异嗜性抗体的干扰；如果结果不在线性范围内，则需继续稀释更高的倍数使测定结果在线性范围内为止，表明该稀释倍数下已经逐渐削弱了异嗜性抗体产生的干扰，则可乘以该稀释倍数，所得结果接近真实值[3]。
笔者将标本稀释10倍，结果已在线性范围，说明干扰已被削弱，结果接近真实值。

  • 验证三

笔者联系试剂厂家，吸取部分标本寄回厂家研发部门，通过使用专门的异嗜性抗体检测试剂对样本进行测定。结果显示该标本中存在较高浓度的异嗜性抗体，导致结果出现异常。
原因分析：异嗜性抗体包括天然抗体和一些自身抗体，可能来自于污染的食物、与动物的接触或动物血清类疫苗接种等[4]，可能是该查体人接触过以上的相关东西等，导致体内产生了较高浓度异嗜性抗体。

 

心得体会
尽管对异嗜性抗体的研究已经有了很大的进步，但因其对于很多不同的结合位点都有亲和力，到目前为止还没有一种方法可以彻底消除异嗜性抗体的干扰。
大多数商品试剂盒的说明书上都有类似“该检测结果应与整体临床表现（病历、临床检查、其他检测和诊断程序）结合进行解释”的提示，并且提示结果升高并不一定存在疾病。这些警告对于干扰因素较多的免疫测定法是非常必要的。
检验人应当认识到标本中异嗜性抗体的存在所具有的潜在危害性，这种干扰因素的存在会更加考验我们身为检验人的专业性和对结果的敏感性，当出现与临床不符的可疑结果时，作为检验人员应该寻找干扰原因，运用多种检验技术进行检验，力求得出较为准确的结果。
【参考文献】
[1] 文国泰. 联合检测甲胎蛋白和癌胚抗原对肝肿瘤的鉴别诊断[J]. 实用医院临床杂志,2008,5(5):34-36.
[2] 汪怀周,贺铮雯,鲁琼,等. 异嗜性抗体干扰引起血清多项肿瘤标志物显著升高1例[J]. 检验医学,2019,34(11):1054-1056.
[3] 韦维. 异嗜性抗体在免疫测定中干扰的研究进展[J]. 国际检验医学杂志,2010,31(10):1123-1126.
[4] 由婷婷,鲁军,程歆琦,禹松林,侯立安. 异嗜性抗体干扰化学发光方法检测cTcI的处理和分析[J]. 现代检验学杂志,2018,33(2):101-104.

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编辑：青翠欲滴

审校：晨晨

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    2022-04-13 丁鹏鹏

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